實(shí)驗(yàn)動(dòng)物標(biāo)本采集方法
一、血液的采集
常用的采血方法有割（剪）尾采血、眼眶靜脈叢采血、斷頭采血、心臟采血、頸靜脈（動(dòng)脈）采血、股動(dòng)脈（靜脈）采血、耳靜脈采血、前肢頭靜脈才學(xué)、后肢小靜脈采血等。
二、尿液的采集
實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的尿液常用代謝籠采集，也可通過其他裝置來采集。
（一）用代謝籠采集尿液
代謝籠用于收集實(shí)驗(yàn)動(dòng)物自然排出的尿液，是一種特別設(shè)計(jì)的為采集實(shí)驗(yàn)動(dòng)物各種排泄物的密封式飼養(yǎng)籠，有的代謝籠除可收集尿液外，又可收集糞便和動(dòng)物呼出的CO2。一般簡(jiǎn)單的代謝籠主要用來收集尿液。防在代謝籠內(nèi)飼養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，可通過其特殊裝置收集尿液。
（二）導(dǎo)尿法收集尿液
施行導(dǎo)尿術(shù)，較適宜于犬、猴等大動(dòng)物。一般不需要麻醉，導(dǎo)尿時(shí)將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物仰臥固定，用甘油潤(rùn)滑導(dǎo)尿管。對(duì)雄性動(dòng)物，操作員用一只手握住陰莖，另一只手將陰莖包皮向下，暴露龜頭，使尿道口張開，將導(dǎo)尿管緩慢插入，導(dǎo)尿管推進(jìn)到尿道膜部時(shí)有抵抗感，此時(shí)注意動(dòng)作輕柔，繼續(xù)向膀胱推進(jìn)導(dǎo)尿管，即有尿液流出。雌性動(dòng)物尿道外口在陰道前庭，導(dǎo)尿時(shí)于陰道前庭腹側(cè)將導(dǎo)尿管插入陰道外口，其后操作同雄性動(dòng)物導(dǎo)尿術(shù)。
用導(dǎo)尿法導(dǎo)尿可采集到?jīng)]有污染的尿液。如果嚴(yán)格執(zhí)行無菌操作，可收集到無菌尿液。
（三）輸尿管插管采集尿液
一般用于要求計(jì)量單位時(shí)間內(nèi)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物排尿量的實(shí)驗(yàn)。剖腹后，將膀胱牽拉至腹腔外，暴露膀胱底兩側(cè)的輸尿管。在兩側(cè)輸尿管近膀胱處用線分別結(jié)扎，于輸尿管結(jié)扎處上方剪一小口，向腎臟方向分別插入充滿生理鹽水的插管，用線結(jié)扎固定插管，即可見尿液從插管滴出，可以收集。采尿過程中要用38℃熱生理鹽水紗布遮蓋切口及膀胱。
（四）壓迫膀胱采集尿液
實(shí)驗(yàn)人員用手在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物下腹部加壓，手法既輕柔又有力。當(dāng)增加的壓力使實(shí)驗(yàn)動(dòng)物膀胱括約肌松弛時(shí)，尿液會(huì)自動(dòng)流出，即行收集。
（五）穿刺膀胱采集尿液
實(shí)驗(yàn)動(dòng)物麻醉固定后，剪去下腹部恥骨聯(lián)合之上，腹正中線兩側(cè)的被毛，消毒后用注射針頭接注射器穿刺。取鈍角進(jìn)針，針頭穿過皮膚后稍微改變角度，以避免穿刺后漏尿，然后刺向膀胱方向，邊緩慢進(jìn)針邊回抽，直到抽到尿液為止。
（六）剖腹采集尿液
按上述穿刺膀胱采集尿液法做術(shù)前準(zhǔn)備，其皮膚準(zhǔn)備范圍應(yīng)更大。剖腹暴露膀胱，直視下穿刺膀胱抽取尿液。也可于穿刺前用無齒鑷夾住部分膀胱壁，從鑷子下方的膀胱壁進(jìn)針抽尿。
（七）提鼠采集尿液（即反射排尿法）
鼠類被人抓住尾巴提起即出現(xiàn)排尿反射，以小鼠的這種反射zui明顯。可以利用這一反射收集尿液。當(dāng)鼠類被提起尾巴排尿后，尿滴掛在尿道外口附近的被毛上，不會(huì)馬上流走，操作人員應(yīng)迅速用吸管或玻璃管接住尿滴。
（八）膀胱插管法
腹部手術(shù)同輸尿管插管。將膀胱翻出腹外后，用絲線結(jié)扎膀胱頸部，阻斷它同尿道的通路。然后在膀胱頂部避開血管剪一小口，插入膀胱漏斗，用絲線做以荷包縫合固定。漏斗正對(duì)著輸尿管的入口處。注意不要緊貼膀胱后壁而堵塞輸尿管。下端接橡皮管插入帶刻度的容器內(nèi)以收集尿液。
三、胸水和腹水的采集
（一）胸水的采集
主要采用胸腔穿刺法收集實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的胸水，也可處死實(shí)驗(yàn)動(dòng)物剖開胸腔采集胸水。
1、穿刺點(diǎn)定位
于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物腋后線第11～12肋間隙穿刺，穿刺針緊貼肋骨上緣，否則容易損傷肋間神經(jīng)。也可在胸壁近胸骨左側(cè)緣第4～5肋間隙穿刺。
2、穿刺方法
收集胸水常采用穿刺法。如果實(shí)驗(yàn)不要求動(dòng)物繼續(xù)存活，也可用處死動(dòng)物剖胸取胸水。穿刺部位在動(dòng)物脊側(cè)腋后線胸壁第11～12肋間隙穿刺較安全。此部位是肺zui下界之外側(cè)，既可避免損傷肺組織造成氣胸，又易采集在隔肋竇的胸水。此外，也可在腹側(cè)胸壁近胸骨左側(cè)緣第4～5肋間隙穿刺。如果有條件在穿刺針頭與注射器之間連一個(gè)三通管，但應(yīng)注意正確運(yùn)用三通管。
實(shí)驗(yàn)動(dòng)物取立位或半臥位固定，局部皮膚去毛、消毒、麻醉，穿刺針頭與注射器之間接三通連接裝置，實(shí)驗(yàn)人員以左手拇指、食指繃緊局部皮膚，右手用帶夾的橡皮管套上12～14號(hào)針頭，沿肋骨前緣小心地垂直刺入（緊靠肋骨下緣處垂直進(jìn)針），穿刺肋間肌時(shí)產(chǎn)生一定阻力，當(dāng)阻力消失有落空感時(shí)，說明已刺入胸膜腔，用左手固定穿刺針，打開三通連接裝置，緩慢抽取胸水。穿刺結(jié)束迅速拔出針頭，輕揉穿刺部位，促進(jìn)針孔閉合并注意消毒。
操作中嚴(yán)防空氣進(jìn)入胸腔，始終保持胸腔負(fù)壓。穿刺應(yīng)用手控制針頭的深度，以防穿刺過深刺傷肺臟。
（二）腹水的采集
1、抽取狗等大動(dòng)物腹水，讓狗按自然站立位固定，穿刺部位在恥骨前緣與臍之間，腹中線兩側(cè)。剪毛消毒，局部浸潤(rùn)麻醉。操作者左手姆、食指緊繃穿刺部位的皮膚，右手控制穿刺深度做垂直穿刺。注意不可刺的太深，以免刺傷內(nèi)臟。穿刺針進(jìn)入腹腔后，腹水多時(shí)可見因腹壓高而自動(dòng)流出。腹水太少可輕輕回抽，并同時(shí)稍稍轉(zhuǎn)動(dòng)一下針頭，一旦有腹水流出，立即固定好針頭及注射器的位置連續(xù)抽取。
2、抽取大鼠、小鼠的腹水方法簡(jiǎn)單，用左手拇指及食指捏住動(dòng)物頸部皮膚，無名指、小手指及手掌夾住其尾巴固定好動(dòng)物，使其腹部略朝上，在腹股溝和腹中線之間，消毒皮膚，用8號(hào)針頭刺入腹腔，如腹壓高腹水自然流出，如腹水太少，可借助注射器抽取。
抽腹水時(shí)注意不可速度太快，腹水多時(shí)不要一次大量抽出，以免因腹壓突然下降導(dǎo)致動(dòng)物出現(xiàn)循環(huán)功能障礙等問題。
四、分泌液的采集
（一）陰道分泌物的采集
適于觀察陰道角質(zhì)化上皮細(xì)胞。
1、滴管沖洗法
用消毒滴管吸取少量生理鹽水仔細(xì)、反復(fù)沖洗被檢雌性動(dòng)物陰道，將沖洗液吸出滴在載波片上晾干后染色鏡檢。也可直接將沖洗液置于低倍顯微鏡下觀察，根據(jù)細(xì)胞類型變化鑒別實(shí)驗(yàn)動(dòng)物動(dòng)情周期中的不同時(shí)期。
2、棉拭子法
用消毒棉拭子旋轉(zhuǎn)插入動(dòng)物陰道內(nèi)，然后在陰道內(nèi)輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)幾下后取出，即可進(jìn)行涂片鏡檢。有的動(dòng)物如大、小鼠等，陰道液較少，取其陰道液時(shí)，可用先浸濕后又?jǐn)D盡無菌生理鹽水的棉拭子取陰道液，這種棉拭子比干棉拭子容易插入陰道。對(duì)體型較大的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，也可先按摩或刺激其陰部，而后再采集其陰道液。
3、刮取法
用光滑的玻璃小勺或牛角制的小刮片慢慢插入陰道內(nèi)，在陰道壁輕輕刮取一點(diǎn)陰道內(nèi)含物，進(jìn)行涂片鏡檢。
（二）精液（semen）的采集
1、人工陰道套采精液法
本法適用于犬、豬、羊等大動(dòng)物，采用特制的人工陰道套套在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物陰莖上采集精液。采精時(shí)，一手捏住陰道套，套住雄性動(dòng)物的陰莖，以*套住雄性動(dòng)物的陰莖為佳，插入陰道套后，若實(shí)驗(yàn)動(dòng)物發(fā)出低叫聲，表明已經(jīng)射精。此時(shí)可取下陰道套，拆下采精瓶，取出精液，迅速做有關(guān)檢查。
2、陰道栓采精法
本法是將陰道栓涂片染色，鏡檢凝固的精液。陰道栓是雄性大、小鼠的精液和雌性陰道分泌物混合，在雌鼠陰道內(nèi)凝結(jié)而成白色稍透明、圓錐形的栓狀物，一般交配后2～4小時(shí)即可在雌鼠陰道口形成，并可在陰道停留12～24小時(shí)。
3、其他采精液法
將發(fā)情的雌性動(dòng)物放在雄性動(dòng)物一起，當(dāng)雄性動(dòng)物被刺激發(fā)情后，立即將雄性動(dòng)物分開，再用人工法刺激其射精。也可按摩雄性動(dòng)物的生殖器或用電流等物理方法刺激雄性動(dòng)物的陰莖或其他性敏感區(qū)，使雄性動(dòng)物被刺激發(fā)情，直至射精，用采精瓶采集射出的精液。
（三）乳汁的采集
用按摩擠奶收集乳汁的方法適合犬、豬、羊等大動(dòng)物乳汁的采集。選用哺乳期的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，在早上采集乳汁量zui多，用手指輕輕按摩實(shí)驗(yàn)動(dòng)物乳頭，使乳汁自然流出，如乳汁不能自然流出，可張開手掌從乳房基底部朝乳頭方向按摩、擠壓整個(gè)乳房，即可擠出乳汁。
五、消化液的采集
（一） 唾液
1、直接抽取法
在急性實(shí)驗(yàn)中，可用吸管直接插入動(dòng)物口腔或唾液腺導(dǎo)管抽吸唾液，此法非常簡(jiǎn)單，但從口腔抽吸唾液會(huì)有雜質(zhì)混入。
2、腮腺瘺法
在慢性實(shí)驗(yàn)中，收集狗的唾液，要用外科手術(shù)方法將腮腺導(dǎo)管開口移向體外，即以腮腺導(dǎo)管為中心，切成一直徑約2～3cm的圓形粘膜片，將此粘膜片，與周圍組織分開，穿過皮膚切口引到頰外，將帶有導(dǎo)管開口的粘膜片與周圍的皮膚縫合，腮腺分泌的唾液就流出頰外。這種方法可以收集到較純凈的唾液。
（二）胃液
1、直接收集胃液法
急性實(shí)驗(yàn)時(shí)，先將動(dòng)物麻醉，將插胃管經(jīng)口插入胃內(nèi)，在灌胃管的出口連一注射器，用此注射器可收集到胃液，此法適用于狗等大型動(dòng)物。如是大鼠，需手術(shù)剖腹，從幽門端向胃內(nèi)插入一塑料管，再由口腔經(jīng)食道將一塑料管插入前胃，用pH7.5、35℃左右的生理鹽水，以12ml/h的流速灌胃，收集流出液，進(jìn)行分析。
2、制備胃瘺法
在慢性實(shí)驗(yàn)中，收集胃液多用胃瘺法，如全胃瘺法、巴氏小胃瘺法、海氏小胃瘺法等。制備小胃是將動(dòng)物的胃分離出一小部分，縫合起來形成小胃，主胃與小胃互不相通，主胃進(jìn)行正常消化，從小胃可收集到純凈的胃液。應(yīng)用該法，可以待動(dòng)物恢復(fù)健康后，在動(dòng)物清醒狀態(tài)下反復(fù)采集胃液。
（三）胰液和膽汁
在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中，主要是通過對(duì)胰總管和膽總管的插管而獲得胰液或膽汁。狗的胰總管開口于十二指腸降部，在緊靠腸壁處切開胰管，結(jié)扎固定并與導(dǎo)管相連，即可見無色的胰液流入導(dǎo)管。大鼠的胰管與膽管匯集于一個(gè)總管，在其入腸處插管固定，并在近肝門處結(jié)扎和另行插管，可分別收集到胰液和膽汁。有時(shí)也可通過制備胰瘺和膽囊瘺來獲得胰液和膽汁。
六、腦脊液的采集
（一）狗、兔腦脊液的采集通常采取脊髓穿刺法
穿刺部位在兩髂連線中點(diǎn)稍下方第七腰椎間隙。動(dòng)物輕度麻醉后，側(cè)臥位固定，使頭部及尾部向腰部盡量彎曲，剪去第七腰椎周圍的被毛。消毒后操作者在動(dòng)物背部用左手姆、食指固定穿刺部位的皮膚，右手持腰穿刺針垂直刺入，當(dāng)有落空感及動(dòng)物的后肢跳動(dòng)時(shí)，表明針已達(dá)椎管內(nèi)（蛛網(wǎng)膜下腔），抽去針芯，即見腦脊液流出。如果無腦脊液流出，可能是沒有刺破蛛網(wǎng)膜。輕輕調(diào)節(jié)進(jìn)針方向及角度，如果腦脊液流的太快，插入針芯稍加阻塞，以免導(dǎo)致顱內(nèi)壓突然下降而形成腦疝。
（二）大鼠腦脊液的采集可采用枕大孔直接穿刺法
在大鼠麻醉后，頭部固定于定向儀上。頭頸部剪毛、消毒，用手術(shù)刀沿縱軸切一縱行切口（約2cm）用剪刀鈍性分離頸部背側(cè)肌肉。為避免出血，zui深層附著在骨上的肌肉用手術(shù)刀背刮開，暴露出枕骨大孔。由枕骨大孔進(jìn)針直接抽取腦脊液。抽取完畢逢好外層肌肉、皮膚。刀口處可撒些磺胺藥粉，防止感染。采完腦脊液后，應(yīng)注入等量的消毒生理鹽水，以保持原來腦脊髓腔的壓力。
七、骨髓的采集
1、大鼠、小鼠骨髓的采集
用頸椎脫臼法處死動(dòng)物，剝離出胸骨或股骨，用注射器吸取少量的Hank平衡鹽溶液，沖洗出胸骨或股骨中全部骨髓液。如果是取少量的骨髓作檢查，可將胸骨或股骨剪斷，將其斷面的骨髓擠在有稀釋液的玻片上，混勻后涂片涼干即可染色檢查。
2、大動(dòng)物骨髓的采集
狗等大動(dòng)物骨髓的采集可采取活體穿刺方法。先將動(dòng)物麻醉、固定、局部除毛、消毒皮膚，然后估計(jì)好皮膚到骨髓的距離，把骨髓穿刺針的長(zhǎng)度固定好。操作人員用左手把穿刺點(diǎn)周圍的皮膚繃緊，右手將穿刺針在穿刺點(diǎn)垂直刺入，穿入固定后，輕輕左右旋轉(zhuǎn)將穿刺針鉆入，當(dāng)穿刺針進(jìn)入骨髓腔時(shí)常有落空感。狗骨髓的采集，一般采用髂骨穿刺。狗等大動(dòng)物常用的骨髓穿刺點(diǎn)：胸骨：穿刺部位是胸骨體與胸骨柄連接處。肋骨：穿刺部位是第5～7肋骨各點(diǎn)的中點(diǎn)。脛骨：穿刺部位是股骨內(nèi)側(cè)、靠下端的凹面處。如果穿刺采用的是肋骨，穿刺結(jié)束后要用膠布封貼穿刺孔，防止發(fā)生氣胸。
在線客服
會(huì)員_a.png)